általánosság
Az immunfunkció laboratóriumi vizsgálat, amely lehetővé teszi a biológiai mintában jelen lévő gamma-globulinek azonosítását és tipizálását.
Részletesen, az elemzés lehetővé teszi a beteg vérében vagy vizeletében az immunglobulin osztályok (IgA, IgG, IgM, IgE vagy IgD) és a könnyű lánc kappa vagy lambda típusának tanulmányozását sajátos elektroforetikus mobilitásuk szerint. . Ezt követően az azonosítás céljából, hogy melyik gamma-globulin részt vesz, az immunfunkció magában foglalja a specifikus antigének inokulálását a fragmenshez vagy a megfelelő antitesthez ( anti-immunglobulin antiszérumok ): a feltételezett változás jelenlétét megerősíti a kialakulás. szemcsékből vagy mikroszkópból látható.
Ez az információ nagy jelentőséggel bír a plazmasejtes patológiák (gammopátiák vagy plazmasejt-diszkráziák) diagnosztizálásához. Az immunfunkció nagyon hasznos a myeloma multiplex, a Waldenström makroglobulinémia és a primer amiloidózis (más néven könnyű lánc amiloidózis) értékelésére és ellenőrzésére.
Mi
Az immunglofonálás (vagy az IFE rövidítésű immunelektroforézis ) egy olyan technika, amely képes meghatározni, hogy az immunglobulinok (IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) vagy a könnyű lánc kappa vagy lambda típusa van- e és melyik osztályban van jelen. a beteg vérszérumának és vizeletének feleslege vagy hibája.
A kappa és lambda könnyű láncok jellemzik a monoklonális komponenst, azaz az azonos kémiai szerkezetű antitesteket.
Szérum és vizelet immunfunkció: mikor jelenik meg?
A plazmacelluláris diszpláziák vagy a gammopathiák olyan ismeretlen etiológiájú rendellenességek heterogén csoportja, amelyekre jellemző:
- A B-sejt-klón aránytalan eloszlása;
- Az immunglobulin (vagy annak polipeptid alegysége) szérumában és / vagy vizeletben jelenléte strukturálisan és elektroforetikusan homogén ( monoklonális ).
Általában a plazmasejt-diszkráziákat a szérum és a húgyfehérjék elektroforézisének diagnosztizálásával diagnosztizálják, majd szérum immunfixálással (IFE).
Ugyanakkor vérvizsgálat írható elő az immunglobulinok teljes koncentrációjának mérésére (IgG + IgM + IgA).
További információ: Immunoglobulinok - Mit jelentenek, hogyan mérik és referenciaértékek »Immunofixáció: alapelv
Az immunfunkció egy olyan vizsgálat, amely két fázist foglal magában (először az elektroforézist agaróz gélben, majd az immunprecipitációt specifikus antiszérummal ).
Az immunfunkció első lépése ugyanaz, mint a fehérjék (vagy protidogramma) ELEKTROFORÉZISÉNEK, ezért szükség van arra, hogy emlékezzünk néhány fogalomra:
- Az elektroforézis olyan laboratóriumi elemzés, amely lehetővé teszi a vérszérumban vagy más biológiai mintákban jelenlévő fehérjék mennyiségének meghatározását, és minden frakció esetében megmutatja, hogy vannak-e minőségi eltérések. Ez a vizsga különösen lehetővé teszi a fehérjék öt csoportra való szétválasztását: albumin, alfa 1 globulin, alfa 2 globulin, béta-globulin és gamma-globulin ; az utóbbit pontosabban immunfunkcióval vizsgáljuk.
- Az elektroforézis az elektromosan töltött részecskék különböző migrációs sebességén alapuló elválasztási módszer, egy oldat és egy közömbös tápközeg segítségével, egy elektromos áram hatására, amelyet egy egyenáram képez. A gyakorlatban a vizsga kihasználja az elektromos töltést és a beteg mintájában lévő fehérjék molekulatömegét . Az elektromágneses impulzus alatt ezek a makromolekulák típusonként vándorolnak és „csoportosulnak”, jellemző módon reagálva a stresszre. Az eredmény ( elektroforetikus nyomkövetés ) különböző csúcsokból és görbékből áll, amelyekhez a fehérje frakciók megfelelnek. Általában az első csúcs, magasabb és szűkebb, az albumin csúcsa; kövessük a globulin csúcsokat, sokkal alacsonyabbak, mint az albumin. A pályán megjelenő csúcsok amplitúdójának és intenzitásának növekedése vagy csökkenése az egyes kategóriákban a fehérjék nagyobb vagy kisebb jelenlétét jelzi; minél több fehérje van jelen egy sávban, annál nagyobb az adott csúcs. A gamma-globulinok esetében, ha az egyes osztályok (IgA, IgM, IgG stb.) Mennyiségét szeretnénk tudni, egyszeri adagolásra lesz szükség. Általában minél nagyobb a gamma-globulin egy sávban, annál nagyobb a megfelelő csúcs; a magasság megfelel egy adott kategóriába tartozó fehérjék teljes mennyiségének.
IMMUNOFISSATION :
1) Agarózgél elektroforézis : a páciens mintáját (szérum vagy vizelet) egy elektroforetikus csíkra, azaz a migrációra (általában agaróz gélre) helyezik el. Egy egyenáram által generált elektromos mező alkalmazásával különböző sávokban elválasztás érhető el. A gyakorlatban a keverékben jelen lévő minden típusú gamma-globulin (azaz a betegmintában) a molekulatömeg és az elektromos töltés alapján migrál. A gamma-globulinok eltérő elektroforetikus mobilitása lehetővé teszi azok azonosítását (mindegyik egybeesik az elektroforetikus úton lévő konkrét sávval), és megfigyelheti az esetleges anomáliákat.
2) Immunprecipitáció specifikus antiszérummal (rögzítés) : specifikus antitestek vagy fragmensek specifikus antigénjeit minden egyes elektroforetikus csíkhoz (anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-light kappa vagy anti-lánc) adjuk hozzá. lambda könnyű lánc). Ha egy monoklonális fehérje van jelen, az antigén és a megfelelő antitest közötti kölcsönhatás szűk sávot eredményez (ez azt jelenti, hogy az eredmény pozitív), és egy csapadék képződik, amely látható szemmel vagy mikroszkóppal látható. Végül a mintát feldolgozzuk (azaz mosjuk és színezzük), hogy eltávolítsuk a nem kicsapódott fehérjéket a gél szárítása és az eredmények leolvasása.
Miért fut
Mi az Immunofixáció?
A szérum immunfixálása egy olyan vizsgálat, amelyet a gamma-globulinok megváltozásával jellemezhető betegségek diagnosztizálására vagy megfigyelésére használnak, különösen akkor, ha a monoklonális komponens ( monoklonális gammopátia ) előállítására vonatkozik.
Ha többet szeretne megtudni: Monoklonális gammopátiák - mi és melyek »Az immunfunkció hasznos a plazma sejtek diszkrázisának gyanúja esetén, és alapvető fontosságú a MIELOMA (és a kapcsolódó patológiák) és a MGUS (a bizonytalan értelemben vett "monoklonális gammopátiák") vizsgálatához.
Ez a teszt lehetővé teszi a Waldenström makroglobulinémia és könnyűláncú amiloidózis ( AL ) értékelését is.
Immunixálás: mikor írják elő a vizsgálatot?
Az immunfunkciós indikáció klinikai vagy laboratóriumi bizonyítékokat tartalmaz, amelyek a monoklonális antitestek vagy immunglobulinok szérumban vagy vizeletben történő megváltozásának gyanúját feltételezik .
Például ez a vizsga lehetővé teszi a szeroprotektív vagy vizelet elektroforézis eredményének elmélyítését: ha az elektroforetikus nyomon követés során a gamma-globulinnak megfelelő sávok eltérnek a normálságtól, az immunfunkció azonosítja, hogy melyik fehérjét módosítják a mennyiség tekintetében és minőség.
Összességében elmondható, hogy a szérum immunfixálása előírható:
- Abban az esetben, ha más laboratóriumi tesztek abnormális eredményt adnak a hiányzó vagy kisebb és nagyobb mennyiségű plazmafehérjék tekintetében a normának megfelelően;
- Ha feltételezhető egy monoklonális komponens termelésével jellemzett betegségek jelenléte, mint például:
- Többszörös mielóma és annak variánsai;
- Waldenström makroglobulinémia;
- Amyloidosis;
- Ha a beteg olyan tüneteket és tüneteket észlel, amelyek monoklonális gammopátia vagy multiplex myeloma jelenlétére utalnak, mint például:
- Csontfájdalmak;
- anémia;
- Könnyű fáradtság;
- Ismétlődő fertőzések;
- Megmagyarázhatatlan törések.
Többszörös mielóma esetén a fehérjék elektroforézise és immunfunkciója jelentősen hasznos a betegség előrehaladásának nyomon követésére is (nyomon követés).
Immunofixáció: mely mintákon végezhető?
A biológiai minták, amelyeket immunfunkciónak vethetnek alá, főként a következők:
- Szérum (szérum immunfixálás);
- Vizelet (vizelet immunfunkció);
- Alkohol * (folyadékimmunizálás).
* Megjegyzés : A CSF vagy a cerebrospinális folyadék az agy, a gerincvelő, a koponya idegei és a gerinc gyökerei által áthatoló és védő folyadék.
Normál értékek
A monoklonális vagy poliklonális gamma-globulinok NEGATÍV eredménye a szérum és a vizelet immunfunkciójának eredménye NORMÁL .
Gamma globulinok
A gamma-globulinok a teljes plazmafehérjék 9-20% -át teszik ki.
- Referenciaérték: Gamma-globulin : 0, 9-1, 4 g / dl
Ami az immunglobulinok teljes koncentrációját illeti ( IgG + IgM + IgA ), úgy véljük, hogy a 600 és 2300 mg / dl közötti értékek normálisak.
- Referenciaérték az immunogobulinok szérumában :
- IgA : 90-400 mg / dl
- IgG : 800-1800 mg / dl
- IgM : 60-280 mg / dl
- IgD : 0, 3-0, 4 mg / dl
- IgE : 20-440 mg / dl
Megjegyzés : a vizsga referenciaintervalluma kissé eltérhet az elemző laboratóriumban használt kortól, nemtől és műszerektől függően. Ezért célszerű a közvetlenül a jelentésben felsorolt tartományokat vizsgálni. Emlékeztetni kell arra is, hogy az elemzések eredményeit a háziorvosnak kell értékelnie, aki ismeri a beteg orvosi történelmét.
Magas értékek - okok
A gamma-globulinok növekedése:
- A poliklonális, ha az immunglobulinok előállítása heterogén, vagyis a gamma-globulinok különböző komponensei - amelyeket különböző plazma sejtekből állítanak elő vagy származnak - befolyásolják a növekedés;
- Monoklonális, ha a gamma-globulint a plazma sejtek egyetlen típusából (klónjából) állítják elő vagy származnak.
A poliklonális gamma-globulinok növekedése társítható:
- Krónikus gyulladásos betegségek;
- Rheumatoid arthritis;
- Szisztémás lupus erythematosus;
- Krónikus májbetegségek (például hepatitis és cirrózis);
- Akut és krónikus fertőzések;
- Legutóbbi immunizációk;
- Néhány tumorbetegség.
A monoklonális gamma-globulinok magas értékei helyett a következőkre utalhatnak:
- Néhány daganat és krónikus gyulladás;
- Többszörös mielóma;
- lymphoma;
- Waldenström makroglobulinémia.
A gamma-globulin feleslegét hipergammaglobulinémiának nevezik, míg a hiányt hipogammaglobulinémiának nevezik.
Alacsony értékek - okok
A gamma-globulinok csökkentése genetikai alapon jelezheti az immunrendszer különböző betegségeinek jelenlétét, beleértve az agammaglobulinémiát vagy egy másodlagos immunhiányt (pl. AIDS, veseelégtelenség, akut szepszis és Cushing-szindróma).
A gamma-globulin-értékek csökkenése a citosztatikus gyógyszerek, az immunszuppresszánsok és a szteroidok alkalmazásától is függhet.
Hogyan történik?
Szérum immunfunkció
A szérum immunfunkciója egy egyszerű vért von le a kar vénájából. A szérumot a biológiai minta centrifugálásával nyerjük; ez lehetővé teszi, hogy a sejteket tartalmazó frakciót (corpuscularis rész) a vérből (plazmából) elkülönítsük. A vérszérum véralvadási faktoroktól mentes (fibrinogén, VIII-as faktor, V-faktor és protrombin).
A vizelet immunfunkciója
A vizelet immunfunkciójának elvégzéséhez szükséges egy kis mennyiségű vizelet összegyűjtése egy speciális steril tartályba. Az orvos és a laboratórium jelzése alapján a mintát pontos időzítés nélkül ( véletlenszerűen ) vagy 24 órán belül lehet összegyűjteni.
A likőr beoltása
Az elemzéshez kis mennyiségű cerebrospinális folyadékot kell bevennünk a tű behelyezésével a gerincvelő belsejébe ( lumbalis punkció ).
előkészítés
Immunofixáció: hogyan készül fel a vizsgára?
- A vérmintavétel előtt néhány laboratórium megkövetelheti, hogy legalább 10-12 órás gyorsaságot észleljen. Ez idő alatt kis mennyiségű víz megengedett.
- Az immunfunkciót a nap bizonyos időpontjában (véletlenszerűen) vagy 24 órán keresztül gyűjtött vizelettel végezhetjük, így előzetesen szükséges a megfelelő steril tartályok előállítása.
- Ami a folyadék immunfunkcióját illeti, nem szükséges külön előkészítés.
Mit változtathat a vizsga eredménye?
Egyes gyógyszerek befolyásolhatják az immunfunkció eredményét, ezért tanácsos az orvosnak jelenteni a folyamatban lévő gyógyszeres kezeléseket.
A vizsgálatot megelőző hat hónapban a vakcinák beadása (immunizálás) és a gyógyszerek, például a fenitoin, prokainamid, orális fogamzásgátlók, metadon és terápiás gamma-globulin alkalmazása növelheti az immunglobulinok koncentrációját. Más gyógyszerek, amelyek megváltoztathatják a vizsgálati eredményt, a kortikoszteroidok, a neomicin, az acetilszalicilsav és a klórpromazin.
Az eredmények értelmezése
Az immunfunkció eredményét más elemzések eredményeivel együtt értékeljük. A megállapítás értelmezése a háziorvos vagy a referencia-szakember felelőssége, aki képes azonosítani és összehasonlítani a specifikus gamma-globulint érintő változásokat (például a G-immunglobulinokkal egybeeső sávot) bizonyos betegségekkel. Ez az értékelés megerősíti vagy alátámasztja a diagnosztikai hipotézist: az immunfunkció általában normális gamma-globulin profilt mutat, vagy egy monoklonális fehérjét vagy poliklonális modellt azonosít .
Miután a betegséget meghatározták, immunfunkciókat lehet végezni:
- Idővel figyelje a betegséget, majd kövesse annak lefolyását (nyomon követés);
- Ellenőrizze a terápiás protokoll hatékonyságát .
Előnyei és hátrányai az Immunofixációnak
A fehérje elektroforézissel összehasonlítva, immunfunkció:
- Gyorsabb : az immunizálási eredményeket általában három órán belül kapjuk meg;
- Ez érzékenyebb (bár enyhén): az immunfunkció kimutatható egy olyan immunglobulin, amely kizárt a fehérje-elektroforézisből, különösen alacsony koncentrációknál (kevesebb, mint 1 gramm / liter).
Továbbá az immunfunkció:
- Részlegesen automatizálható ;
- Könnyen olvasható és értelmezhető .
Az immunfunkció azonban drágább, mint a fehérje elektroforézis, és csak gamma-globulin analízist tesz lehetővé.
Normál eredmény
Immunfekcionálás esetén a normál útvonal a következőket tartalmazza:
- Egy sáv, amely egybeesik a sötétebb immunglobulin G-vel ( IgG );
- A sáv, amely megfelel a legkönnyebb A immunglobulinnak ( IgA );
- Az immunglobulin M ( IgM ) sáv hiánya;
- A kappa sáv sűrűbb, mint a lambda (könnyű lánc), 2: 1 arányban.
Normál eredmény esetén a sávok nagyok, és a színsűrűség fokozatosan és egyenletesen csökken az immunelektroforézis szalag szélei felé.
Poliklonális gamma-globulinok
Bizonyos esetekben az összes immunfixációs sáv ugyanolyan mértékben egyenletesen el van takarva. Ez a modell a poliklonális immunglobulinok jelenlétét mutatja. Ebben az esetben a sávok szélesek, és az immunelektroforetikus szalag széleire való átmenet fokozatos. Az IgM sáv - általában nincs jelen - széles.
Monoklonális gamma-globinok
Amikor egy keskeny sáv éles élekkel azonosítható az immunfunkció útján, azt jelenti, hogy a monoklonális komponensek keresése pozitív .
A monoklonális immunglobulin azonosítása hasznos a következő állapotok diagnosztizálásához :
- Meghatározatlan jelentőségű monoklonális gammopátia (MGUS);
- Többszörös mielóma;
- Waldenstrom makroglobulinémia;
- Amyloidosis.
Emellett immunfunkció is alkalmazható a plazma sejtek diszkráziáinak (pl. Myeloma multiplex és Waldenstrom macroglobulinemia) kezelésének monitorozására . Ha a monoklonális fehérje szintje csökken, vagy a kemoterápia után nem észlelhető, akkor a kezelésre adott válasz lehet . Ezzel szemben a kezelés ellenére fennmaradó monoklonális fehérje a refrakter betegség jele .
Kérjük, vegye figyelembe . A negatív immunfunkciós eredmény nem mindig zárja ki a plazmasejt diszkráziáját. Például egy nem szekréciós multiplex myeloma vagy oligosecretory negatív eredményeket adhat mind a vizeletben, mind a szérumban. Ezért, ha a gammopátia diagnosztikai gyanúja még mindig magas, akkor a Kappa / Lambda Libere Fényláncok ( K / L arány ) arányának meghatározását jelezzük.
A sclerosis multiplex immunfunkciója és diagnózisa
A cerebrospinális folyadék (folyadék) immunfunkcióját akkor írják elő, ha az orvos a sclerosis multiplex jelenlétét gyanítja. Ebben az esetben a meghatározott út jellemző, mivel az úgynevezett oligoklonális sávok jelenlétét hangsúlyozza. Az eredményt a laboratóriumi jelentésben pozitívnak tekintjük. Figyelembe kell venni, hogy a sávok általában nem figyelhetők meg a szérum immunfunkciójában, mivel ezek korrelálnak az intratekális gamma-globulinok termelésével .
Meg kell azonban jegyezni, hogy ez a megállapítás nem feltétlenül erősíti meg a diagnózist, mivel az oligoklonális sávok más állapotai is előfordulhatnak a cerebrospinalis folyadékban.
Más szavakkal, az oligoklonális sávok azonosítása folyékony immunfixálással nagyon hasznos a sclerosis multiplex diagnózisának támogatására, de ezt más vizsgálatokkal is meg kell erősíteni . Más olyan körülmények, amelyek ezt az eredményt biztosítják , a központi idegrendszer gyulladása, beleértve a HIV-vel kapcsolatos encephalitist, neurosifiliszt, neuroszarkoidózist, Lyme meningoencephalitist, központi idegrendszeri malignitást, optikai neuromielitist és keresztirányú mielitit.
